一、采样

1. 组织样本

1.1 新鲜组织:黄豆大小1~2粒(约0.1g),液氮速冻后,-80℃保存(可以保存在RNALater中,切记不要保存在TRIzol中)

1.2 血液:≥1mL,EDTA抗凝管或加EDTA/柠檬酸钠抗凝剂,-80℃保存,避免反复冻融(抗凝剂不能用肝素/肝素钠)

1.3 细胞系:≥5*106个细胞;加细胞冻存液(血清+10%DMSO),液氮慢冻/收集得到细胞沉淀,液氮速冻

1.4 提取cf/ctDNA:血浆:≥3mL;血清:≥3mL;脑脊液样本 :≥4mL;分装于1.5mL无核酸酶离心管中,-80℃保存;自提cfDNA:总量>30ng,体积>10μL,干冰运输。

1.5 FFPE贴片/卷片:厚度在5-10μm,含组织面积大于25mm2的切片6张,尽量保证组织中恶性肿瘤细胞所占比例较大,至少超过60%,贴片取样会有损失,建议送样量加倍

1.6 石蜡块:组织体积>1.5cm3

1.7 唾液:≥4mL,清水漱口1~2次,然后吐掉,漱口后等候至少5分钟方可采集唾液,在30分钟内采集4mL唾液(不含泡沫),等体积保存液倒在采集管中,充分颠倒混匀,常温保存

1.8 毛发:>20根,毛发必须含有毛囊

1.9 拭子:>4个

2. 核酸样本

2.1 人外显子:浓度>24ng/μl,体积在20μl~120μl,总量>500ng(建议1ug)。

2.2 DNA小片段文库:浓度>24ng/μL,体积在20μl~120μl总量>500ng

二、打包

1. 样本的打包

1.1 核酸样品建议使用质量好的1.5ml或2ml 低吸附EP管装载样品,并用封口膜封口。为了防止样品管破裂,或者污染和混乱,不要使用诸如PCR管、0.5ml EP管、八联管、96孔板、深孔板等非标准管。非标准管不利于样品保存以及后续实验的进行。

1.2 组织样本建议根据送样量使用合适规格带螺纹帽的EP管、冻存管或者离心管装载组织样品,并用封口膜封口。

1.3 为防止样品管在运输过程中受到干冰挤压破裂,最好将样品管放到50ml离心管或其他支撑物中,并在支撑物里添加棉花或卫生纸缓冲。大量样品建议将EP管放置在冻存盒中,并在冻存盒外面包裹气泡垫。如使用锡箔纸、自封袋装载的样品,为防止运输中受挤压破损,建议将锡箔纸折叠整齐装在自封袋中,在样品包装外再用气泡垫包好并固定。

1.4 对于血液样品,建议采用5-10ml 塑料抗凝采血管装载,为了防止运输过程中采血管因挤压而损坏,需要将每支采血管管身均用气泡垫包好,然后放置到塑料或纸质包装盒中。

1.5 用乙醇沉淀的样品由于运输中会有少量乙醇挥发出,建议将样品管盖用封口膜缠绕4-5圈。

1.6 为便于处理和保存,组织样品送样量请不要超过建议送样量的5倍(特殊的得率较低的样品除外)。

2. 样本的名称标识

2.1 所有的样品必须具有清晰的标记,并且简洁明了。

2.2 使用锡箔纸包装的组织样品建议在锡箔纸内外均标记样品名称,并将锡箔纸放在自封袋中,自封袋外面再标记上样品名称,防止锡箔纸上样品名称模糊引起样品混乱。

2.3 使用乙醇沉淀的核酸样品,由于挥发出的乙醇会使记号笔的标记模糊,建议用油性记号笔将样品名称写在标签纸上,然后用透明胶带将标签纸粘贴在样品管壁上,并缠绕2-3圈。

2.4 样品名称建议使用“字母+数字”命名方式标注在管盖。其他信息如日期、浓度、物种等可标注在管壁。所有标注内容需与《样品信息单》保持一致。