一、细胞类样本
样本类型 | 采样量 | 样本保存和运输 |
贴壁细胞 悬浮细胞 | 交联细胞:107建议细胞初始活性在 90%以上 | 液氮速冻后,干冰运输 |
二、动物组织
样本类型 | 采样量 | 样本保存和运输 |
动物组织(包含肿瘤组织) | 肿瘤组织:0.5-1g; 个体较小动物如小鼠、雏鸡、斑马鱼等肝脏、心脏、脑等组织:0.5-1g; 个体较大动物如猪、牛、羊等肌肉、晚期胚胎等组织:2-3g; 脂肪组织8-10g; 昆虫等整只个体:2-3g; | 液氮速冻后,干冰运输 |
动物组织处理方法: (1)取新鲜组织,剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需组织类型; (2)迅速用预冷的0.9%生理盐水漂洗将组织表面残留的血液冲洗干净; (3)如果组织体积较大,尽量将组织切成长宽高均≤0.5cm的小块(即黄豆大小); (4)将处理好的组织样本混合均匀后保存于10ml或更大体积的旋盖冻存管中,准确标记; (5)迅速置于液氮中冷冻1-2h,后放置-80℃或液氮中保存。 肿瘤组织处理方法: (1)对肿瘤组织的取材,尽可能准确地判定肿瘤和正常组织,如果有可能请根据冰冻切片报告的结果来判断要进行研究的取材部位,肿瘤组织应将周围的正常组织切除干净(正常组织也应将周围的肿瘤组织切除干净); (2)离体后请立即分割组织,约2-3mm厚,将组织放入2.0ml或更大体积旋盖冻存管中;迅速置于液氮中冷冻1-2h,然后转移至-80℃或液氮中保存。 |
三、植物组织
样本类型 | 采样量 | 样本保存和运输 |
植物组织 | 株系:3-5g; 根系:5g以上; 茎杆:3-5g; 叶片:3-5g; 果实:8-10g; 种子:3-5g; 花序、花蕊、花粉:0.5-1g; | 置于密封袋中,液氮速冻,干冰运输。建议选取幼嫩的叶片,种子、根等。 |
植物组织处理方法: (1)取新鲜植物组织,大田或野外获取的材料,取材后需将材料表面的灰尘或泥土冲洗干净,吸干; (2)如果组织体积较大,应尽量将组织剪切成小块放入10ml或更大体积的冻存管中,或者使用锡箔纸包严后放入自封袋,准确标记; (3)迅速置于液氮中冷冻1-2h,然后转移至-80℃或液氮中保存。 |
四、其他类型样本
样本类型 | 采样量 | 样本运输 |
IP产物 | 浓度∶> 2ng/μL 体积∶20μL ≤ V ≤ 120μL IP产物:≥ 10ng(单次建库5ng) 100-500bp间有明显主带 | 干冰运输 |
自建库 | 体积:≥ 15μL 浓度:≥ 3ng/μL 总量:≥ 10ng (备注插入片段分布范围) | 干冰运输 |
五、注意事项
(1)二倍体,有参考基因组(拼接到染色体水平),注释完整(基因水平,有外显子、内含子、CDS)。
(2)收集好的细胞/组织样品放到离心管或EP管中(不要将样品直接装入密封袋)。
(3)勿使用RNAlatter、TRIzol、酒精保存。
(4)组织类样本切记不可反复冻融。