1.1组织保存液寄送样本

  组织保存液应在4℃条件下保存（效期6个月，有沉淀/冻融后不可使用），切勿冻存；

  寄样时，先将样本放入装有组织保存液的储存管中，组织尽量无菌放入液体中，组织保存液应当浸没组织，然后迅速盖紧加封口膜包装好。

  组织保存液寄送样本小Tips：

  Step1、首先准备一个泡沫箱和适量冰袋，注意请勿使用-80℃冰箱冰袋用于邮寄样本

  Step2、标明样本名称，用适量的塑料泡沫对装有组织的保存液管进行包裹

  Step3、确保管子包裹完好

  Step4、用保鲜膜或者胶带封好

  Step5、置于冰袋上，保证不和冰袋直接接触

  Step6、找一些填充物进行填充，确保样本在其中不会过多震荡

注意：寒冷天气下，可借助保温桶等设备防止组织结冰；胰腺类样本注意使用特殊组织保护液；

  大于0.2g实体瘤组织（如需进行流式分选，根据分选的要求样本量通常要大于0.6g），保护液能完全浸没组织为宜，一般样本1mL可保证浸没；

  血液（全血）/骨髓血样本置于EDTA抗凝管中，人4mL（特殊治疗/疾病需6mL，冻存PBMC细胞量需5×106 cells），鼠1-2mL。

  如样本量足够建议首次寄送时同一样本2-3管重复，以防万一；

  需标明：样本名称，组织类型，离体时间，浸入组织保存液时间；

  寄送时装有样本的储存管不能和冰袋直接接触，需用泡沫包裹，保证4℃左右的低温环境；

  新鲜组织送样量





常规组织常规肿瘤、器官组织等绿豆大小达到0.08g可以尝试有风险，细胞量可能偏少。
黄豆大小正常，可以尝试，细胞量通常可以达到上机要求。 坏死类需适量提高送样量。
花生大小正常，可以尝试，细胞量通常十分充足。 坏死类需适量提高送样量
腺体类肿瘤及癌旁（例乳腺、胰腺、肝脏、肾脏、肠道、性腺、卵巢、垂体等）花生大小

正常，可以尝试，细胞量通常十分充足，最少0.6g（3粒黄豆大小）。

胰腺类注意使用特殊组织保护液（胰腺/胰腺癌）。

皮肤类皮肤花生壳大小

正常：要求送样量达到1g为宜，组织量大约为一个花生壳大小(1cm*2cm)。

疾病、坏死、角质化严重：要求送样量为正常的2倍，约2g，2cm*4cm。

脑组织类脑花生大小

人：400mg。

小鼠（成年）：半脑。

骨组织样本软骨类花生大小软骨组织需要1g（一颗中等花生米大小）以上的组织量，达到送样量通常消化后细胞量充足。

硬骨类成人中指指甲大小（2-3块

硬骨组织需要10g以上的送样量，可事先用骨钳将组织处理成1cm*1cm左右的小块（10g大约2.5-3块左右），达到送样量通常消化后细胞量充足。

血管类人主动脉、肺动脉及静脉花生壳大小

动脉：要求送样量达到1g为宜，组织量大约为一个花生壳大小(1cm*2.5cm)。

静脉：要求送样量为动脉的2倍，约2g，2cm*5cm。


小鼠血管 2根数量若干根，总量达到6cm为宜。
体液类、冲洗液类脑脊液、胸水、腹水、滑膜液、肺泡灌洗液15-50mL

无菌取样，提取体液后，直接放入15ml或者50ml离心管中；冲洗液类建议100mL以上。并做好标记。由于此类样本细胞得率低，建议尽可能多提供。

样本寄送：置于4℃环境进⾏保存运输。

1.2 新鲜细胞悬液

（1）自选缓冲液需注意选用无钙、镁、EDTA等影响酶活性物质，官方推荐含0.04% BSA的PBS;

（2）细胞量尽量保证在1×106cells以上;

（3）如需流式分选，分选后目的细胞尽量保证在1×10^5cells以上；

（4）冰袋寄送（注意不要选择干冰）， 寄送时装有样本的储存管不能和冰袋直接接触，需用泡沫包裹，保证4℃左右的低温环境； 

1.3冻存细胞干冰寄送

（1）冻存细胞寄送方法

1）分离的细胞梯度冻存（程序降温仪或者异丙醇-80℃过夜后液氮保存）；建议冻存密度3-6×10^6cells /mL(管)，每管1mL；如细胞量足够建议首次寄送时同一样本2-3管重复，以防万一；

2）将液氮保存的细胞，干冰寄送，干冰量需充足；

3）细胞复苏后活率大于75%将直接进行上机，活率小于75%的细胞不建议上机；

注：细胞冻存请使用专用的细胞冻存管；建议首次寄送预实验时同一处理（每一个重复）送 2-3 份样本，以做备选；

 （2）细胞冻存方法（如细胞尚未冻存，可提供如下冻存方法）

1）将制备好的单细胞悬液离心（300-500g，5分钟，4℃），去上清，细胞缓冲液重悬后计数（浓度700-1200 cells/μL），调整细胞总量5-10×106cells（冻存细胞风险较大）；

2）备注：实验室需备台式冷冻离心机（水平转子15mL离心管适配器）；注意试剂和仪器无菌，操作过程要求无菌操作；

3）对于活性大于80%的细胞进行离心（300-500g，5分钟，4℃），去上清，加入冻存液，重悬细胞，然后将1mL细胞悬液加入到细胞冻存管中，拧紧盖子；

4）将细胞冻存管放到程序降温盒中（推荐异丙醇冻存盒）；将程序降温盒放入到-80℃，24小时后选择干冰寄送或者液氮保存；

5）干冰寄送：将细胞冻存管放到干冰中，冻存管做好标记（样本名称、冻存时间），选择干冰15-20公斤（夏季可以适度增加）。

1.4 冻存组织寄送（液氮速冻组织寄送抽核处理）

（1）组织样本要求：

      一般组织建议0.2g-0.5g/管（如需进行流式分选，0.6-1g/管，不同组织有差异），组织液氮速冻，如样本量足够建议首次寄送同一样本2-3管重复，以作备用

      若穿刺样本量少，则不质控直接抽核

（2）10x官网建议：在整个实验过程中RNA酶抑制剂浓度是1U/μL

风险提示：抽核后质控为显微镜观察，非定量判断，有一定误差；另外非哺乳动物细胞文献及标准比较少，对于单核测序来说，存在风险。

1.5 植物样本寄送

（1）植物样本要求 植物类样本支持原生质体制备与植物抽核制备，均需寄送活株。 寄送过程中可以使用木架固定培养瓶及幼苗，以保证运输途中植物完整性及状态的稳定性。

制备的目标组织量建议>2g，幼嫩组织优先，木质含量高的组织类型成功率不稳定。

（2）关于特殊样本类型

含淀粉样本（如甘薯、人参、三七、马铃薯等）无法进行原生质体制备，只能抽核处理； 对于抽核类样本，如样本涉及真菌侵染、细菌处理、病毒、虫害等处理，需要确认样本详细情况，是否存在寄生/残留，如有残留/寄生，则无法通过流式进行核悬液的纯化实验。

1.6 类器官组织寄送

送样建议：类器官细胞得率低，建议尽可能多提供，或进行预实验测试细胞得率

（1） 悬液类样本量：大于2x106 cells

（2） 离心后的沉淀样本量：黄豆大小，建议大于0.2g

（3） 新鲜样本寄送过程中建议使用类器官的完全培养基，冰袋寄送

（4）冻存组织建议尽量去除类器官培养基，液氮速冻

（5） 需提前确认类器官是否含有支架，如含支架，需提供支架材料的溶解方案或试剂

1.7 动物样本寄送

（1）常规样本

对于常规动物组织样本、血液等，上机要求和单细胞转录组捕获上机质检标准一致；

（2）非常规样本

对于非常规样本，诸如鱼类、贝类等，建议进行活体寄送，放置在养殖液体中，充氧寄送

1.8 FFPE样本寄送

（1）石蜡块：优先建议提供石蜡块（带卡槽），要求被包埋组织横截面积>0.5cm2，蜡块密封后冰袋寄送

（2）石蜡卷：要求石蜡卷现切现用，先送质检样本，质检合格后再送正式样本

质检样本要求：5µm厚度5-6卷，现切现用（7天之内），置于EP管内，密封后冰袋寄送；

正式样本要求：25um厚度4-6卷，现切现用（7天之内），每两张石蜡卷，置于一个1.5ml EP管内，密封后冰袋寄送，切片厚度不可减小，需保证石蜡卷完整性；

1.9 体液类/冲洗液类样本寄送

（1）送样建议：无菌取样，提取体液后，直接放入15ml或者50ml离心管中，冲洗液类建议100mL以上。并做好标记。

（2）样本寄送：置于4℃环境进⾏保存运输。