1. 送样建议

1.1 WGS全基因组脱靶检测

1.1.1 细胞类样本

样本类型送样量样本保存和运输
细胞样本 ≧5×106个建议1-2个备份 液氮保存，干冰运输。

 细胞处理方法：

（1）显微镜下观察，确定生长状态是否良好，是否有细菌污染；

（2）送样前，样品做好相应处理：细胞冻存液慢冻，液氮长期保存；或离心收集细胞液，直接液氮速冻。

1.1.2 动物组织

样本类型送样量样本保存和运输
动物组织 

常规组织≧1g/份

珍贵样本≧0.5g/份

建议备份

置于密封袋中，液氮速冻，干冰运输。

动物组织处理方法：

（1）取下新鲜组织，立即剔除结缔组织和脂肪等杂质。

（2）将组织转移至新离心管中，用预冷的PBS溶液漂洗至将组织表面的残留血液冲洗干净。

（3）将冲洗干净的组织样本取出并用无尘纸擦干水分，若组织体积较大，应在冰上将组织切成小块或薄片（每份约50mg），之后置于2ml旋盖冻存管内，准备标记样本名称。

（4）迅速置于液氮中冷冻30min，然后转移至-80℃冰箱中保存。

1.1.3 其他类型样本

样本类型 送样量
全血≥1.5ml 使用EDTA抗凝管收集保存
基因组DNA≥0.6μg

1.2 Crisper Screen脱靶检测

样本类型 送样量
纯化的PCR产物质量≥1.5μg，浓度≥60ng/μl，目的片段大小250-280bp最佳，靶位点尽量靠近左端或右端引物，避免设计在PCR产物中间位置，PCR产物需要提供扩增序列的上下游引物序列。
文库质量>30ng，体积>10μL；目的片段大小250-280bp

2. 注意事项

（1）【勿】使用TRIzol保存。

（2）取样过程中，为减少人为造成的样品间差异，可以采取如下措施：取样时间、部位、处理条件、性别、年龄、操作等过程尽可能保持一致，以免影响实验结果的可重复性和可信度。

（3）WGS插入检测项目后期要结合Sanger测序进行最终确定插入位置；建议的插入片段<5000bp，利于结合Sanger验证。